D-核糖-1-磷酸的其他制備方法


D-核糖-1-磷酸的制備方法除化學(xué)合成法(以D-核糖為原料經(jīng)磷酸化反應(yīng)合成)和生物轉(zhuǎn)化法(利用微生物或酶將D-核糖轉(zhuǎn)化為目標(biāo)產(chǎn)物)外,還可通過(guò)以下途徑實(shí)現(xiàn):
核糖磷酸酶催化反應(yīng)
通過(guò)核糖磷酸酶(ribose-phosphate isomerase)的作用,將D-核糖-5-磷酸轉(zhuǎn)化為D-核糖-1-磷酸。該反應(yīng)基于酶促異構(gòu)化機(jī)制,在溫和條件下即可實(shí)現(xiàn)底物轉(zhuǎn)化,具有較高的反應(yīng)特異性。
雙酶級(jí)聯(lián)反應(yīng)
利用脫氨酶與嘌呤核苷磷酸化酶(PNP)構(gòu)建級(jí)聯(lián)體系:
底物轉(zhuǎn)化:脫氨酶將鳥(niǎo)苷(Guo)轉(zhuǎn)化為難溶性黃嘌呤(Xan),推動(dòng)反應(yīng)平衡向產(chǎn)物方向移動(dòng)。
磷酸解反應(yīng):PNP酶催化鳥(niǎo)苷的磷酸解,生成D-核糖-1-磷酸和鳥(niǎo)嘌呤。
產(chǎn)物分離:通過(guò)調(diào)節(jié)pH值沉淀黃嘌呤,利用鹽析法純化D-核糖-1-磷酸,最終獲得高純度產(chǎn)物。
羥基保護(hù)-磷酸化-脫保護(hù)策略
羥基保護(hù):采用異丙叉基、三苯基甲基或三甲基乙酰基等基團(tuán)對(duì)D-核糖的2,3-位羥基進(jìn)行選擇性保護(hù),防止副反應(yīng)發(fā)生。
磷酸化反應(yīng):在保護(hù)基存在下,對(duì)1-位羥基進(jìn)行磷酸化修飾,引入磷酸基團(tuán)。
脫保護(hù)處理:通過(guò)酸性水解或催化氫化移除保護(hù)基團(tuán),釋放游離的D-核糖-1-磷酸。
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