Cyanine5.5-辣根過氧化物酶的作用機制
2024-10-27
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Cy5.5-HRP|Cyanine5.5-辣根過氧化物酶
Cyanine5.5 - 辣根過氧化物酶(Cy5.5-HRP)是一種經過 Cyanine5.5 標記的辣根過氧化物酶分子。
一、辣根過氧化物酶的作用機制
辣根過氧化物酶(HRP)是一種廣泛應用于生物技術和醫學領域的酶。其主要作用機制是利用過氧化氫(H?O?)作為電子受體,催化底物發生氧化反應。
1.催化反應
HRP 可以催化多種底物的氧化反應,其中常用的底物是鄰苯二胺(OPD)、3,3',5,5'- 四甲基聯苯胺(TMB)等。在有 H?O?存在的情況下,HRP 將底物氧化為有色產物,從而實現對目標物質的檢測或標記。
例如,在酶聯免疫吸附測定(ELISA)中,HRP 標記的抗體與抗原結合后,加入底物進行顯色反應,通過檢測顏色的強度可以確定抗原的含量。
2.電子傳遞
HRP 的催化作用涉及到電子傳遞過程。HRP 含有一個鐵卟啉輔基,稱為血紅素。在催化反應中,血紅素中的鐵離子可以在不同的氧化態之間轉換,從而接受和傳遞電子。
首先,HRP 與 H?O?反應,形成一種活性中間體,稱為化合物 I。化合物 I 具有很高的氧化能力,可以將底物氧化為產物,并同時被還原為化合物 II。化合物 II 再進一步被還原為原始的 HRP,完成一個催化循環。
二、Cyanine5.5 標記后的作用及機制變化
1.熒光標記
Cyanine5.5 是一種近紅外熒光染料,具有較高的熒光量子產率和良好的光穩定性。將 Cyanine5.5 與 HRP 結合后,可以利用其熒光特性進行生物成像和檢測。
在生物體內,近紅外熒光具有較低的背景干擾和較高的組織穿透能力,因此 Cyanine5.5-HRP 可以用于深層組織的成像和分析。
2.多模態檢測
Cyanine5.5-HRP 結合了熒光標記和酶催化活性,可以實現多模態檢測。除了通過熒光成像檢測目標物質外,還可以利用 HRP 的催化活性進行比色或化學發光檢測。
這種多模態檢測方法可以提高檢測的靈敏度和特異性,同時也為研究人員提供了更多的檢測手段和選擇。
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