三碘甲狀腺原氨酸-雞卵清白蛋白偶聯物的制備方法有哪些?
2024-10-20
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三碘甲狀腺原氨酸-雞卵清白蛋白偶聯物|3,3’,5-Triiodothyronine-Ovalbumin Conjugate(T3-OVA Conjugate)
三碘甲狀腺原氨酸 - 雞卵清白蛋白偶聯物的制備方法通常是先通過化學合成的方法得到三碘甲狀腺原氨酸,然后將其與雞卵清白蛋白進行偶聯35。具體的制備步驟如下:
1.合成三碘甲狀腺原氨酸:通過化學反應將碘和酪氨酸結合,形成三碘甲狀腺原氨酸。
2.活化三碘甲狀腺原氨酸:使用適當的活化劑,如碳二亞胺(EDC)或 N - 羥基琥珀酰亞胺(NHS),將三碘甲狀腺原氨酸的羧基或氨基活化,使其能夠與雞卵清白蛋白上的氨基或羧基發生反應。
3.偶聯反應:將活化后的三碘甲狀腺原氨酸與雞卵清白蛋白在適當的緩沖液中進行反應,通常在室溫下攪拌數小時,使兩者發生共價結合,形成三碘甲狀腺原氨酸 - 雞卵清白蛋白偶聯物。
4.純化和鑒定:使用凝膠過濾、離子交換層析或親和層析等方法對反應產物進行純化,以去除未反應的物質和雜質。然后通過紫外可見光譜、SDS-PAGE 或 Western blot 等方法對純化后的偶聯物進行鑒定,確保其質量和純度。
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