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核酸提取羧基磁珠200nm的介紹

2025-09-14 [54]

200nm羧基磁珠在核酸提取中具有以下特性與應(yīng)用分析

一、核心特性

  1. 物理特性

    • 粒徑與分散性:200nm羧基磁珠粒徑均一,表面羧基密度可達(dá)550nmol/mg(顯著高于100nm磁珠的350nmol/mg),提供高比表面積,增強(qiáng)核酸吸附能力。

    • 磁響應(yīng)性:超順磁性設(shè)計(jì),磁吸時(shí)間短,便于快速分離,減少操作時(shí)間。

    • 穩(wěn)定性:在pH 1-13、硫氰酸胍、DMF、DMSO等條件下穩(wěn)定,適應(yīng)多種核酸提取緩沖液體系。

  2. 化學(xué)特性

    • 表面功能化:羧基基團(tuán)(-COOH)可通過(guò)EDC/NHS活化,與蛋白質(zhì)、核酸、多肽等生物配體共價(jià)偶聯(lián),實(shí)現(xiàn)特異性結(jié)合。

    • 吸附機(jī)制:在PEG和NaCl存在下,核酸構(gòu)象由線狀轉(zhuǎn)變?yōu)榫砬驙睿┞敦?fù)電荷磷酸基團(tuán),通過(guò)Na+與羧基形成離子橋,實(shí)現(xiàn)核酸吸附。

二、核酸提取應(yīng)用

  1. 常規(guī)核酸提取

    • 優(yōu)勢(shì):200nm羧基磁珠可通過(guò)調(diào)整PEG和NaCl比例,實(shí)現(xiàn)核酸片段的精準(zhǔn)篩選。例如,第一輪吸附大片段核酸后棄磁珠,第二輪吸附目標(biāo)片段,洗脫回收率可達(dá)85%以上(100bp以上片段)。

  2. 高通量測(cè)序文庫(kù)構(gòu)建

    • 片段分選:200nm羧基磁珠配合DNA片段篩選試劑,可高效分選50-800bp片段,滿(mǎn)足NGS(下一代測(cè)序)對(duì)文庫(kù)片段大小的要求。

  3. 病毒核酸檢測(cè)

    • 富集能力:通過(guò)固定Oligo(dT)30中間探針,200nm羧基磁珠可高效富集冠狀病毒RNA,提高檢測(cè)靈敏度。

三、操作優(yōu)勢(shì)

  1. 簡(jiǎn)化流程:無(wú)需離心,通過(guò)磁場(chǎng)快速分離,減少樣本損失和交叉污染。

  2. 兼容性:適配多種試劑體系(如異丙醇、結(jié)合液),可根據(jù)樣本類(lèi)型調(diào)整磁珠用量(如微量DNA提取時(shí)用量為15-20μl)。

  3. 穩(wěn)定性:4℃豎直密封保存,避免冷凍及離心操作,維持分散穩(wěn)定性。

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